RNA pull down
2019.08.27
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RNA pull down 是一种研究RNA与蛋白结合互作的实验技术方法,生物体内许多功能的核心是RNA与蛋白的结合来进行调控,如:蛋白的合成,mRNA的组装,细胞发育调控等。基本原理是:通过体外转录获取标记的RNA作为探针,与细胞细胞裂解液孵育,免疫共沉淀的方法获取RNA结合捕获的蛋白,后续可通过WB检测验证结合蛋白,或通过质谱(MS)的方法得到结合蛋白的信息

技术原理:

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技术服务流程:

1.克隆载体的构建

2.体外转录形成标记的RNA探针

3.探针与裂解液孵育结合,形成磁珠-RNA-蛋白复合物

4.纯化获取蛋白产物

5.WB检测或MS分析

服务优势:

1.生物信息学预测,分析RNA motif与蛋白的结合,可通过截断与截短的方式研究结合的序列信息,为客户提供深度分析和研究方案

2.设置完整组别,包括Input组,正义链组,反义链组,阴性组,实验更加严谨可靠

3.提供可直接用于文章的标准结果图,以及实验原图结果

4.提供完善的实验报告,更利于文章的撰写和申请

适用研究:

各种通路,代谢路径,分子机制,细胞调控,药物诱导等方向的调控研究,寻找或验证RNA结合的蛋白,如:结合蛋白为某些转录因子,代谢过程中的核心酶,通路中的调控蛋白等

客户提供:

1.基因信息及转录本信息(或含目的基因的载体)

2.活细胞:3-4*10^7

3.新鲜组织:组织量>0.3-0.5g

4.产物WB检测的抗体(>5-10ug)

辉园苑提供:

1.体外转录检测图,产物银染胶图

2.完整实验报告

3.可直接用于文章使用的处理结果图


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