ChIP实验
2019.08.27
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     染色质免疫沉淀技术(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP):是一种研究体内转录因子与基因组DNA之间互作结合的方法。基本原理是活细胞状态下,通过多聚甲醛固定,形成蛋白-DNA复合物,运用超声(或酶解)方法对染色体随机剪切至一定长度范围,通过免疫共沉淀富集结合,纯化获取转录因子蛋白所结合的启动子区域片段,后续产物可用于Q-PCR检测验证或测序分析。

技术原理:

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技术服务流程:

1.细胞交联固定:多聚甲醛固定活细胞(或组织)

2.核质分离:提取细胞核,获取染色质

3.超声破碎:超声断裂染色质,获取一定范围长度的片段

4.免疫共沉淀:获取DNA与蛋白结合的特定复合物

5.解交联:解除DNA与蛋白的交联状态,纯化获取DNA产物

6.Q-PCR检测或建库测序

服务优势:

1.生物信息学方法,预测转录因子蛋白结合的启动子基因,以及预测结合的特定motif,为客户提供多选择信息

2.直接寻找转录因子结合的编码区上游靶基因,精准定位调控基因

3.设置完整组别,包括Input组,阳性组,对照组,阴性组,实验更加严谨可靠

4.提供可直接用于文章的标准结果图,以及实验原图结果

5.提供完善的实验报告,更利于文章的撰写和申请

适用研究:

1.适用于人,大鼠,小鼠等哺乳动物细胞的研究,探讨与验证体内转录因子蛋白调控启动子的关系

2.适用于临床各种组织样品的探讨研究,例:癌组织与癌旁组织,通过ChIP实验获取得到的样品产物DNA,建库测序获取调控的启动子基因

客户提供:

1.IP或ChIP级抗体,抗体量>20ug

2.活细胞:1-2*10^7

3.新鲜组织:组织量>0.1-0.3g

4.验证基因信息

辉园苑提供:

1.WB检测抗体效价与特异性结果图

2.染色体断裂图

3.完整实验报告

4.可直接用于文章使用的处理结果图


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