定点突变
2019.08.27
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      对某个已知基因序列的特定碱基进行定点改变、缺失或者插入。

      体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具,也是实验室中改造/优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能,二者之间的关系是蛋白质组研究的重点之一。定点突变可以改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构,对突变基因的表达产物进行研究有助于人类了解蛋白质结构和功能的关系,探讨蛋白质的结构/结构域。定点突变技术的潜在应用领域很广,比如研究蛋白质相互作用位点的结构、改造酶的不同活性或者动力学特性,改造启动子或者DNA作用元件,提高蛋白的抗原性或者是稳定性、活性、研究蛋白的晶体结构,以及药物研发、基因治疗等等方面。


定点突变的原理

       定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征,是基因研究工作中一种非常有用的手段。

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技术路线:

1.  引物设计。

2.  表达载体设计。

3.  PCR点突变。

4.  DpnI酶消化。

5.  转化扩增载体。


客户需提供:

1.  靶基因/靶蛋白信息。如:已知NCBI编号,基因序列。

2.  靶基因cDNA/DNA模板。


我们的服务:

1.  针对性点突变引物设计及合成。

2.  正常表达载体。

3.  突变后表达载体。

4.  无内毒素质粒扩增提取。

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